Immunochemical methods for ciguatoxins detection in Pacific herbivorous ans carnivorous fish / Pauillac, Serge%Sasaki, Makato%Naar JérômeSeret, B.%Sire, J.Y.-

Public ISBD Titre : Immunochemical methods for ciguatoxins detection in Pacific herbivorous ans carnivorous fish : *** Autre titre : Méthodes immunochimiques de détection des ciguatoxines dans les poissons herbivores et carnivores du Pacifique Auteurs : Pauillac, Serge%Sasaki, Makato%Naar JérômeSeret, B.%Sire, J.Y.-, Editeur : Société Française d'Ichtyologie Année de publication : 1999 Importance : p. 759-773 Format : 24 cm Note générale : BIOPHYSIQUE Catégories : SCIENCES DE LA VIE Mots-clés : MICRO-LISA%IMMUNODETECTION  INTOXICATION%ANTICORPS Résumé : Un conjugué de l'albumine bovine (BSA) et de l'ovalbumine (OVA) avec un fragment synthétique JKLM de la CTX-1B, la plus puissante des ciguatoxines (CTXs) a été préparé. Les liaisons haptène-protéine porteuses ont été établies via le N-hydroxysuccinimide ester du fragment carboxylique, en présesence d'un carbodiimide hydrosoluble. Les conjugués de la BSA et de l'OVA ont servir respectivement à l'immunisation de deux souris BALB/c et à l'analyse de leur réponse immunitaire par ELISA.- Les titres en anticorps (Ac) mesurés par la technique de la dilution finale étaient autour de 1/16 000 dans les deux cas. La grande spécificité des Ac murins a été démontrée par ELISA de type indirect ou compétitif. Dans le format classique en plaques en à 96 puits, les Ac n'ont pas réagi de manière significcative avec la PbTx-3 et d'autres composés de nature polyéther mais ont présenté au contraire 133 pour cent de réaction croisée vis à vis de la CTX-1B.- Des limites de détection pour JKLM et la CTX-b de 50 et 30 picomoles respectivement ont été obtenues avec un antisérum dilué au 1/30 000. Une diminution de la concentration en AC (dilution 1/50 000) a permis d'abaisser le seuil de décomoles de CTX-1B. La sensibilité de cette technique a pu encore être ramenée à 0,6 picomoles de fragment JKLM par utilisation d'un microtest ELISA réalisé en plaques de terasaki. Un essai préliminaire d'évaluation de CTXs dans des extraits lipidiques bruts de poissons a fourni essentiellement la même sensibilité (7 picomoles) que lors des tests de détection de CTX-1B pure réalisés dans les mêmes conditions en plaques standard. En conclusion, le test ELISA compétitif décrit pourrait être amélioré pour permettre en routine le dosage direct des CTXs dans des extraits pisciaires (Résumé d'auteur)- Note de contenu : - - - - - - Numéro du document : 04B Niveau Bibliographique : 2 Indicateur Bibliographique : K Bull1 (Theme principale) : BIOPHYSIQUE Immunochemical methods for ciguatoxins detection in Pacific herbivorous ans carnivorous fish : *** ; Méthodes immunochimiques de détection des ciguatoxines dans les poissons herbivores et carnivores du Pacifique [] / Pauillac, Serge%Sasaki, Makato%Naar JérômeSeret, B.%Sire, J.Y.-,  . - Société Française d'Ichtyologie, 1999 . - p. 759-773 ; 24 cm. BIOPHYSIQUE Catégories : SCIENCES DE LA VIE Mots-clés : MICRO-LISA%IMMUNODETECTION  INTOXICATION%ANTICORPS Résumé : Un conjugué de l'albumine bovine (BSA) et de l'ovalbumine (OVA) avec un fragment synthétique JKLM de la CTX-1B, la plus puissante des ciguatoxines (CTXs) a été préparé. Les liaisons haptène-protéine porteuses ont été établies via le N-hydroxysuccinimide ester du fragment carboxylique, en présesence d'un carbodiimide hydrosoluble. Les conjugués de la BSA et de l'OVA ont servir respectivement à l'immunisation de deux souris BALB/c et à l'analyse de leur réponse immunitaire par ELISA.- Les titres en anticorps (Ac) mesurés par la technique de la dilution finale étaient autour de 1/16 000 dans les deux cas. La grande spécificité des Ac murins a été démontrée par ELISA de type indirect ou compétitif. Dans le format classique en plaques en à 96 puits, les Ac n'ont pas réagi de manière significcative avec la PbTx-3 et d'autres composés de nature polyéther mais ont présenté au contraire 133 pour cent de réaction croisée vis à vis de la CTX-1B.- Des limites de détection pour JKLM et la CTX-b de 50 et 30 picomoles respectivement ont été obtenues avec un antisérum dilué au 1/30 000. Une diminution de la concentration en AC (dilution 1/50 000) a permis d'abaisser le seuil de décomoles de CTX-1B. La sensibilité de cette technique a pu encore être ramenée à 0,6 picomoles de fragment JKLM par utilisation d'un microtest ELISA réalisé en plaques de terasaki. Un essai préliminaire d'évaluation de CTXs dans des extraits lipidiques bruts de poissons a fourni essentiellement la même sensibilité (7 picomoles) que lors des tests de détection de CTX-1B pure réalisés dans les mêmes conditions en plaques standard. En conclusion, le test ELISA compétitif décrit pourrait être amélioré pour permettre en routine le dosage direct des CTXs dans des extraits pisciaires (Résumé d'auteur)- Note de contenu : - - - - - - Numéro du document : 04B Niveau Bibliographique : 2 Indicateur Bibliographique : K Bull1 (Theme principale) : BIOPHYSIQUE

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Code-barres	Cote	Support	Localisation	Section	Disponibilité	Origine
37753	A 7382%Z00 210	Livre	CIDST	Bibliotheque DDI	Exclu du prêt

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